巰基修飾的辣根過氧化物酶（HRP-SH）是一種經(jīng)過化學修飾的辣根過氧化物酶，其分子中引入了巰基（-SH）。以下是其詳細介紹：

結(jié)構(gòu)特點

辣根過氧化物酶是一種含四個二硫鍵的單鏈多肽，由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結(jié)合而成的糖蛋白，含18%碳水化合物。巰基通過與HRP分子中的特定基團反應(yīng)而結(jié)合，形成HRP-SH復(fù)合物。

制備方法

• 化學修飾法：通過特定的化學試劑與辣根過氧化物酶反應(yīng)，引入巰基。例如，使用2-亞氨基硫烷鹽酸鹽與辣根過氧化物酶在適當?shù)木彌_液中反應(yīng)，生成巰基修飾的HRP。

• 試劑盒法：如Abbkine的LliKine™辣根過氧化物酶(HRP)偶聯(lián)試劑盒，提供了一種簡單快速的方案，將HRP直接偶聯(lián)到含有自由氨基的蛋白質(zhì)、多肽或其他配體上。

功能特性

• 催化活性：HRP-SH保留了辣根過氧化物酶的催化能力，能夠催化多種底物的氧化反應(yīng)，如在過氧化氫存在下，催化底物產(chǎn)生顏色變化或化學發(fā)光信號。

• 反應(yīng)性基團：巰基作為反應(yīng)性基團，能夠與其他含有活性基團的分子發(fā)生反應(yīng)，形成穩(wěn)定的共價結(jié)合。例如，巰基可以與馬來酰亞胺基團反應(yīng)，用于標記抗體、蛋白質(zhì)或其他生物分子，實現(xiàn)信號放大和檢測。

應(yīng)用領(lǐng)域

• 免疫檢測：在酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）、免疫印跡（Western blot）、免疫組化等實驗中，HRP-SH可作為標記酶，與抗體結(jié)合，用于檢測抗原或抗體的存在和含量。

• 生物傳感器：可用于構(gòu)建生物傳感器，通過與目標生物分子結(jié)合，產(chǎn)生可檢測的信號變化，用于檢測生物分子、藥物和環(huán)境污染物等。

• 化學合成：巰基可以參與多種化學反應(yīng)，如縮合反應(yīng)和還原反應(yīng)，為藥物合成和材料科學提供多種合成路徑。

注意事項

• 保存條件：HRP-SH應(yīng)在冷藏條件下（-20℃）保存，以保持其活性和穩(wěn)定性。

• 使用前處理：使用前需根據(jù)具體實驗要求進行適當?shù)奶幚?，如溶解、稀釋等，并注意避免反?fù)凍融。

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